基因扩增仪（PCR仪）校准装置操作规程 JJF1527-2015

1. 目的和适用范围

本规程适用于模块加热的聚合酶链反应（PCR）分析仪温度相关计量性能的校准，对于其他类型的PCR仪温度相关计量性能的校准，可参照本规范执行。

1. 校准项目

校准项目包含：温度示值误差、温度均匀度、平均升温速率、平均降温速率。
3   校准点的选取
校准点依据参考：JJF1527-2015 聚合酶链反应分析仪校准规范
校准点一般为30℃，50℃，60℃，70℃，90℃，95℃。
校准点也可依据客户要求。

1.   校准方法

4.1   温度示值误差、温度均匀度校准
4.1.1 将PCR仪及温度校准装置各部件连接完好，在温度传感器表面上涂抹适量导热油， 按图1所示将温度传感器置于PCR仪加热模块中，其他型号的PCR仪可参照该图1进行测试。

图1 温度传感器布点示意图
4.1.2 参照送检单位提供的PCR仪产品使用说明书设定被校PCR仪的温度控制程序，如表1所示，并运行。不能设定为温控程序起点的PCR仪，温控程序参照表1进行设定。
表1  PCR仪温度控制程序标准程序表

4.1.3启动温度校准装置，记录整个数据采集过程并保存。
4.1.4 温度示值误差校准结果按公式（1）和公式（2）计算：

=
式中：
——温控装置工作区域内温度示值误差，℃；
——温控装置工作区域内设定温度值，℃；
——所有测温传感器测定值的平均值，℃；
——第i个温度传感器测定值，℃。
4.1.5 温度均匀度校准结果按公式（3）计算：

式中：
：温度均匀度，℃。
：各测量点在第j次测量中的实测最高温度，℃。
：各测量点在第j次测量中的实测最低温度，℃。

1. 升降温速率校准

4.2.1参照送校单位提供的PCR仪说明书设定该PCR仪的温度控制程序，如表2所示。启动温度校准装置，记录整个数据采集过程并保存。
表2 PCR仪温度控制程序标准程序表

4.2.2 记录仪器显示温度达到设定温度恒温10s后，取50℃温度点，温度记为TA，取90℃温度点，温度记为TB，从TA到达TB的时间记为t，按图2所示模式取点计算平均升温速率。
按公式（4）计算平均升温速率：

式中：
——平均升温速率，℃/s；
——50℃温度点测量值，℃；
——90℃温度点测量值，℃；
——从TA到达TB的时间，s。
4.2.3取90℃温度点，温度记为TA，取50℃温度点，温度记为TB，从TA到达TB的时间记为t，按图2所示模式取点计算平均升温速率。
按公式（4）计算平均升温速率：

式中：
——平均升温速率，℃/s；
——90℃温度点测量值，℃；
——50℃温度点测量值，℃；
——从TA到达TB的时间，s。

1. 操作步骤

5.1 接通PCR（基因扩增仪）电源，开启PCR（基因扩增仪），校准前需将PCR开机预热30min。
5.2 温度示值误差、温度均匀度校准
5.2.1 将PCR仪及温度校准装置各部件连接完好，在温度传感器表面上涂抹适量导热油， 按图1所示将温度传感器置于PCR仪加热模块中，其他型号的PCR仪可参照该图1进行测试。

图1 温度传感器布点示意图
5.2.2 参照送检单位提供的PCR仪产品使用说明书设定被校PCR仪的温度控制程序，如表1所示，并运行。不能设定为温控程序起点的PCR仪，温控程序参照表1进行设定。

表1  PCR仪温度控制程序标准程序表

5.2.3启动温度校准装置，记录整个数据采集过程并保存。
5.2.4 温度示值误差校准结果按公式（1）和公式（2）计算：

=
式中：
——温控装置工作区域内温度示值误差，℃；
——温控装置工作区域内设定温度值，℃；
——所有测温传感器测定值的平均值，℃；
——第i个温度传感器测定值，℃。
5.2.5 温度均匀度校准结果按公式（3）计算：

式中：
：温度均匀度，℃。
：各测量点在第j次测量中的实测最高温度，℃。
：各测量点在第j次测量中的实测最低温度，℃。
5.3升降温速率校准
5.3.1参照送校单位提供的PCR仪说明书设定该PCR仪的温度控制程序，如表2所示。启动温度校准装置，记录整个数据采集过程并保存。
表2 PCR仪温度控制程序标准程序表
4.2.2 记录仪器显示温度达到设定温度恒温10s后，取50℃温度点，温度记为TA，取90℃温度点，温度记为TB，从TA到达TB的时间记为t，按图2所示模式取点计算平均升温速率。
按公式（4）计算平均升温速率：

式中：
——平均升温速率，℃/s；
——50℃温度点测量值，℃；
——90℃温度点测量值，℃；
——从TA到达TB的时间，s。
5.3.3取90℃温度点，温度记为TA，取50℃温度点，温度记为TB，从TA到达TB的时间记为t，按图2所示模式取点计算平均升温速率。
按公式（4）计算平均升温速率：

式中：
——平均升温速率，℃/s；
——90℃温度点测量值，℃；
——50℃温度点测量值，℃；
——从TA到达TB的时间，s。

现场测量操作步骤同上。

本文链接: https://www.cmsensors.com/boke/230403/230403.html

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